Blitz Hot-Start DNA Polymerase

Blitz Hot-Start DNA Polymerase to „hot-start” wersia chimeryczna polimeraza DNA składająca się z polimerazy Pfu oraz domeny wiążącej DNA – SSO7d. Domena ta stabilizuje kompleks polimeraza-matryca, co zwiększa procesywność, szybkość syntezy, wierność oraz stabilność enzymu w warunkach wysokiej siły jonowej.
Enzym katalizuje zależną od matrycy polimeryzację nukleotydów w dwuniciowy DNA w kierunku 5’→3’. Wykazuje również aktywność egzonukleazy 3’→5’ (korekcyjną), co pozwala polimerazie na naprawianie błędów włączania nukleotydów. Enzym nie posiada aktywności 5’ egzonukleazy.
Modyfikacja typu Hot-Start znacząco podnosi czułość i specyficzność analizy. Polimeraza ta jest odpowiednia do wszystkich zastosowań PCR wymagających wysokiej precyzji lub powielania długich amplikonów, takich jak: klonowanie, PCR wysokiej wierności (high-fidelity), long-range PCR oraz przygotowywanie bibliotek NGS.

Zalety:

• Zwiększona szybkość syntezy DNA (do 3000 pz/min)
• Amplifikacja długich fragmentów (10 kpz lub dłuższych)
• Podwyższona tolerancja na inhibitory
• Zwiększona czułość i specyficzność

Obszar zastosowań:

• High-fidelity PCR
• Klonowanie molekularne
• Amplifikacja długich fragmentów DNA
• Bezpośrednia reakcja PCR (direct PCR) bez oczyszczania próbek
• Przygotowywanie bibliotek NGS

Przechowywanie i bufor do rozcieńczania:

• 20 mМ Tris-HCl (pH 8.0), 0.5 mМ EDTA, 100 mМ KCl, 50% glycerol, 0.5% Tween-20

Stężenie:

• 2 U/μl

Warunki przechowywania i transportu:

• Od -24°C do -16°C – 1 rok
• Od +2°C do +8°C – 14 dni
• Dopuszcza się 10 cykli zamrażania/rozmrażania