5X One-Step Plus RT-PCR Mastermix

Opis

5X One-Step Plus RT-PCR Mastermix to gotowy do użycia odczynnik zoptymalizowany do ilościowego oznaczania docelowych sekwencji RNA w czasie rzeczywistym przy użyciu sond hydrolizacyjnych. W jednej probówce RNA jest najpierw przekształcane w cDNA przez odwrotną transkryptazę, a następnie zależna od DNA polimeraza DNA amplifikuje cDNA, umożliwiając jego ilościowe oznaczenie za pomocą qPCR. 5X One-Step Plus RT-PCR Mastermix zawiera wszystkie niezbędne składniki do testu RT-PCR, w tym: odwrotną transkryptazę typu „warm-start”, polimerazę Taq typu „hot-start”, dNTP/dUTP oraz zoptymalizowany bufor. Modyfikacje genetyczne odwrotnej transkryptazy zapewniają poprawioną termostabilność i zwiększoną wydajność przy matrycy RNA bogatej w GC, co skutkuje wyższą wydajnością cDNA. Modyfikacja polimerazy DNA w wersji „hot-start” doprowadziła do znacznego zwiększenia czułości (pojedyncze kopie RNA) i specyficzności testu. Mastermix zawiera również termolabilną UDG, która chroni przed zanieczyszczeniami przenoszonymi między próbami, oraz inhibitor RNazy pochodzenia ludzkiego, aby zapobiec degradacji RNA. Obecność inhibitora RNazy pozwala na amplifikację próbek z nosogardzieli przechowywanych w roztworze soli fizjologicznej i PBS do diagnostyki SARS-CoV-2 bez konieczności wcześniejszej izolacji kwasów nukleinowych. Specjalne dodatki zwiększają również odporność na inhibitory.

Zalety:

• Wysoka czułość (pojedyncze kopie RNA)
• Synteza cDNA i PCR odbywa się w jednej probówce
• Ochrona przed zanieczyszczeniami przenoszonymi między próbami
• Ochrona RNA przed degradacją
• Zwiększona odporność na inhibitory

Obszar zastosowań:

• Multipleks RT-PCR
• Rutynowe RT-PCR
• RT-PCR dla niskich kopii
• RT-PCR z sondami znakowanymi dwiema etykietami

Warunki przechowywania i transportu:

• Od -24°C do -16°C – 1 rok
• Od +2°C do +8°C – 7 dni
• Dozwolone 10 cykli zamrażania/rozmrażania

Informacje dodatkowe